上海遠(yuǎn)慕為您提供人血管生成素1（ANG-1）ELISA試劑盒免費(fèi)代測的服務(wù)，我司是專業(yè)經(jīng)營生物培養(yǎng)基，進(jìn)口/國產(chǎn)ELISA試劑盒，抗體，細(xì)胞，標(biāo)準(zhǔn)品，對(duì)照品的公司，在廣大用戶的幫助和支持下，經(jīng)過不懈的努力，已成為國內(nèi)生命科 學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一，代理許多先進(jìn)水平的高科技產(chǎn)品，包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、診斷等多個(gè)研究及應(yīng)用領(lǐng)域。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò) 遍及全國，在同行獲得*好評(píng)。咨詢！

    產(chǎn)品中文名：人血管生成素1（ANG-1）ELISA試劑盒

    別名：人血管生成素1（ANG-1）ELISA Kit

    供貨商：上海遠(yuǎn)慕

    規(guī)格：96T/48T

    保存：2-8℃

    檢測范圍：125 pg/mL – 4000 pg/mL

    反應(yīng)時(shí)間：1-5h

    所需樣本體積：50-100ul

    標(biāo)記物：標(biāo)板，試劑，標(biāo)準(zhǔn)品等。

    產(chǎn)品用途：用于測定人血清、血漿、組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性。

    檢測種屬：大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬

    產(chǎn)品特點(diǎn)：是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法，由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢。

    Elisa試劑盒產(chǎn)地：加拿大、德國、意大利等進(jìn)口現(xiàn)貨供應(yīng)以及國產(chǎn)各類Elisa試劑盒。

    研究領(lǐng)域：炎癥研究、神經(jīng)生物學(xué)、新陳代謝、信號(hào)通路、免疫學(xué)、傳染病、其他研究。

    Elisa試劑盒供應(yīng)種類：1.人Elisa試劑盒、2.動(dòng)物Elisa試劑盒、3.食品Elisa試劑盒、4.植物Elisa試劑盒、5.農(nóng)產(chǎn)Elisa試劑盒、6.微生物細(xì)胞Elisa試劑盒、7.其他各類Elisa試劑盒。

    試劑準(zhǔn)備：

    試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。

    1. 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶：試劑盒提供6管標(biāo)準(zhǔn)品，每管已標(biāo)定濃度，并且凍干。實(shí)驗(yàn)前在每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品管中加入0.5mL樣本稀釋液，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)助其溶解，使其恢復(fù)為每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品管身標(biāo)注的濃度。

    2. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

    ELISA試劑盒技術(shù)流程：

    雙抗體夾心法（檢測未知抗原）

    1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。

    2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔）。

    3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。

    4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

    5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml

    6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。

    稀釋

    1. 按照C of A說明使用無菌雙蒸水配制濃度為2ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，四度平衡混勻10—30min。

    2. 使用1xAssay Buffer按如下方案稀釋（1：2）

    小心混勻，終濃度為1000pg/ml.

    3. 在ELISA板子中從A1和A2開始到H1和H2每孔分別加入100ul檢測稀釋液。

    4. 取100ul的濃度為2000pg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品加入到A1和A2兩個(gè)孔中。

    5. 用排槍從A1和A2兩個(gè)孔中吸取100ul加入到對(duì)應(yīng)的B1和B2中，吹吸混合均勻，那么 B1和B2標(biāo)準(zhǔn)品濃度為500pg/ml。

    6. 從B1和B2中吸取100ul加入到C1和C2孔中，混勻，那么C1和C2孔標(biāo)準(zhǔn)品濃度為250pg/ml。

    7. 按照步驟4和5的方法倍比稀釋到G1和G2兩孔。G1和G2孔中標(biāo)準(zhǔn)品的濃度是15.6pg/ml，體積為225ul。

    注意：4到6步驟稀釋速度要快，避免時(shí)間過長，建議使用多通道排槍進(jìn)行。

    人血管生成素1（ANG-1）ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)

    1. 試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。

    2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

    3. 濃度為0的S0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白；按照說明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍，zui終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。

    4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

    5. 所有液體組分使用前充分搖勻。

    人血管生成素1（ANG-1）ELISA免疫試劑盒結(jié)果判斷

    繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在Excel工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。

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