實驗科研者們往往對結果zui為關注,而因此忽略了細節(jié)問題,但結果取決于細節(jié)!做實驗,上海遠慕生物教您掌握ELISA試劑盒細節(jié)(供參考,了解更多可在本公司中留言)。
◆根據(jù)采用的載體分為:
1.疏水性聚脂布作為載體;
2.聚苯乙烯微量板為載體;
3.硝酸纖維膜為載體。
ELISA是將酶催化的放大作用與特異性抗原抗體反應結合起來的一種微量分析技術。酶標記抗原或抗體以后,既不影響抗原抗體反應的特異性,也不改變酶本身的活性。因為ELISA試劑盒價格低廉且準確性搞、反應時間短等優(yōu)點,所以適合大批量的檢測,一般常常用于食品安全檢測方面。
◆注意事項:
1、標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應。保存過久可發(fā)生聚合在ELISA中可使本底加深。
2、凍結標本溶解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛混合,不要在混勻器上強烈震蕩。
3、渾濁或有沉淀的標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。
4、反復凍融會使蛋白效價降低,所以代測樣本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。
◆ELISA需要遵循的幾個細節(jié)要點:
1.抗原或抗體能吸附于固相載體表面,并保持其免疫學活性;
2.抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物,而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性;
3.酶結合物與相應抗原或抗體結合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在,而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的,可根據(jù)已知濃度的抗原或抗體的顏色反應的深淺繪制標準曲線并依此計算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。
除了以上內容,在ELISA試劑盒細節(jié)中,稀釋前、后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗的均一性。